集成化蛋白质组学样品前处理 #234
2014年,Mann团队报告了封装的StageTip(iST)方法,作为进一步减少样品制备体积的同时保留FASP方法简单性的解决方案[10.1038/nmeth.2834]。iST设备由一个封闭的尖端室组成,插入膜作为过滤和洗脱过程中的分离单元。因此,处理体积可以减少。iST方法有两个主要亮点。一个是将无强去污剂的细胞裂解和还原/烷基化整合为一步;另一个是在同一设备中结合C18清洁和离子交换分馏,以最小化样品损失和污染。然而,由于蛋白质对C18基质的几乎不可逆结合,样品加载步骤中的污染和样品损失可能是一个关注点。
基于iST的96孔设备也被开发为高通量样品处理平台,并应用于临床蛋白质组学领域[10.15252/msb.20156297]。由于需要在不同平台之间转移96孔板的多个步骤,预计会有进一步改进的全自动版本,以满足严格的临床蛋白质组学应用。